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生物顯微鏡的使用（下）

（三）反射鏡、費(fèi)光器的使用方法和對光方法

1．調(diào)光

對采用反射鏡的顯微鏡，一般都使用平面反射鏡去反射太陽的散射光。只有在光線不足或窗外有干擾時(shí)，才使用凹面反射鏡。采用電光源的顯微鏡，將光亮調(diào)合適即可c

2．聚光器的用法

（1）聚光器高度的調(diào)節(jié)。

一般的聚光鏡．在平行光照射的情況下，其焦點(diǎn)落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm線。當(dāng)使用高倍鏡或油鏡時(shí)，內(nèi)于放大率大，鏡像亮度小，需要較強(qiáng)的照明。因此，應(yīng)把聚光器升至zui高，以便使聚光鏡的焦點(diǎn)正好落在標(biāo)本平面亡。侗在使用低倍物鏡時(shí)，可將聚光器適當(dāng)下降。

（2）可變光闌的用法。

可變光欄起兩個(gè)作用。一是控制射向標(biāo)本的光通量；二是改變聚光器的數(shù)值孔徑。在這兩個(gè)作用中，后者是主要的。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用，從原則上說，聚光器的數(shù)值孔徑應(yīng)與物鏡的相同。否則，分辨率或清晰度會(huì)受影響。

3．對光方法

對電光源顯微鏡來說，使用時(shí)只要將光調(diào)節(jié)合適的亮度即可，不需要進(jìn)行對光。但對使用自然光的低檔顯微鏡來說，要想獲得良好的觀察效果，必須充分利用照明光線。因此，鏡檢之前應(yīng)先對光。對光時(shí)，將低倍鏡旋入光軸，聚光器適當(dāng)升高，可變光闌開

至zui大。然后，從目鏡中觀察，同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)反射鏡．直至視場zui明亮、zui清晰為止。如果利用自然光，則應(yīng)盡量躲避窗框和窗外樹枝的干擾。

（四）物鏡的正確調(diào)焦

對光完成后或調(diào)節(jié)合適光亮后，升高鏡簡或降低載物臺(tái)，將標(biāo)本玻片夾在移動(dòng)器即標(biāo)本夾上，并將欲檢查的部分移至載物臺(tái)通光孔的中央，然后開始調(diào)焦。

無論作何種檢查，均應(yīng)從低倍鏡開始。調(diào)焦時(shí)，先用粗動(dòng)手輪將鏡筒下降．使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小于該物鏡的丁作距離（5mm以下）。為了避免物鏡壓在標(biāo)本玻片上，可從側(cè)面窺視。然后，一邊從目鏡中觀察視野，一邊利用粗動(dòng)手輪將鏡筒徐徐上升，待初見物像后．改用微動(dòng)手輪作精細(xì)調(diào)焦，直至物像zui清晰為止。低倍物鏡的視場大，有利于觀察標(biāo)本的全貌。也可利用移動(dòng)器或縱、橫向調(diào)節(jié)手輪尋覓所觀察的目標(biāo)。如有必要，可將尋得的目標(biāo)移至視場的中心，為高倍鏡觀察做好準(zhǔn)備。

從低倍物鏡轉(zhuǎn)換為高倍物鏡時(shí)，如果物鏡是顯微鏡的原配，所用的載玻片、蓋玻片又符合標(biāo)準(zhǔn)，一般都可以進(jìn)行“等高轉(zhuǎn)換”。即轉(zhuǎn)換后，只要稍微調(diào)節(jié)一下微調(diào)旋鈕．即可看到清晰的圖像。但油鏡不強(qiáng)求齊焦，先將鏡筒升高后再轉(zhuǎn)換，zui后按低倍鏡的調(diào)焦方法重新調(diào)焦。

使用油鏡的方法如下：先將鏡筒升高，取下標(biāo)本玻片，稍稍降低聚光器，并在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油（油小不應(yīng)有氣泡。如有，可用小木簽扎破），再將標(biāo)本玻片放回原處，把聚光器升高，使載玻片的底面與香柏油接觸。這樣，就完成了聚光鏡的伯浸。接著，在蓋玻片上滴上1滴香柏油。然后從側(cè)面窺視．利用粗調(diào)使鏡筒盡量下降，直至油鏡的前透鏡浸沒在香柏油中（但尚未接觸玻片）。這樣，又完成了物鏡的油浸。然后，一邊從臼鏡中觀察．一邊利用微動(dòng)手輪將鏡筒緩緩上升（注意不要擰錯(cuò)了方向，壓碎蓋玻片）．直至視野中出現(xiàn)zui清晰的物像為止。

聚光鏡的油浸，還可以采用另一種滴油方法，即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上，而是把載玻片翻過來，將油滴在載玻片的底面上，然后再翻過去，對準(zhǔn)放置于聚光器上面，再使聚光器上升，來完成聚光器的油浸。這種方法雖然不那么順手，但比較安全。有人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來涂抹香柏油．這種方法容易劃傷鏡片，不宜采用。

在使用油鏡時(shí)，允許在聚光鏡與標(biāo)本之間不加香柏油，即聚光鏡上仍以空氣為介質(zhì)，但這會(huì)犧牲物鏡的分辨率。

如用油鏡觀察后，又需要轉(zhuǎn)回高信物鏡觀察，應(yīng)將蓋玻片上的油擦去，以免站污高倍物鏡。但聚光器廣的油可以石擦，只要把光闌適當(dāng)縮小一點(diǎn)即可。

油鏡使用完畢，要及時(shí)將香柏油擦拭干凈。鏡頭上可先用干凈的擦鏡紙擦I—2次，把大部分的油擦掉。然后用二四苯滴濕的擦鏡紙擦2次，zui后用擦鏡紙擦干凈即可。聚光鏡的擦拭方法與此相同。如標(biāo)本需要保存，玻片上的香柏油可用“拉紙法”擦拭干凈。即將擦鏡紙覆蓋在玻片上，在紙上滴上—滴二甲苯．趁濕將紙條平拖著拄外拉，連續(xù)幾次即可擦干凈。

在整個(gè)調(diào)焦過程中（尤其是高倍物鏡和油鏡的調(diào)焦），每個(gè)動(dòng)作都要緩慢進(jìn)行。否則，物像一閃而過，找不到觀察的目標(biāo)。

備注：禁止轉(zhuǎn)載復(fù)制生物顯微鏡的使用（下）文章http://www.cnnoptics.com/